ຫຼັກການເຮັດວຽກແລະຕົວຢ່າງຂອງຄໍາສັບຂອງ centrifuge

ການແນະນໍາ: Centrifuge - ເບິ່ງບໍ່ເຫັນ "ມືແຍກ"

ສູນທົດລອງຫ້ອງທົດລອງແມ່ນອຸປະກອນທີ່ຂາດບໍ່ໄດ້ໃນຊີວະສາດ, ເຄມີສາດ, ຢາແລະຂົງເຂດອື່ນໆ. ພວກເຂົາໄດ້ແຍກສ່ວນປະກອບທີ່ມີຄວາມຫນາແຫນ້ນທີ່ມີຄວາມຫນາແຫນ້ນໃນນໍ້າໂດຍຜ່ານການຫມູນວຽນດ້ວຍຄວາມໄວສູງ. ບໍ່ວ່າຈະເປັນການຈັດແບ່ງເລືອດ, ການສະກັດກັ້ນຂອງຈຸລັງ, ຫຼືການເຮັດໃຫ້ບໍລິສຸດ nanomainer, centrifuges ມີບົດບາດສໍາຄັນ. ບົດຂຽນນີ້ຈະວິເຄາະຫຼັກການຫຼັກການແລະສະຖານະການການນໍາໃຊ້ແບບປົກກະຕິໂດຍຜ່ານການປະສົມປະສານຂອງກາຟິກແລະຂໍ້ຄວາມ.

ຫຼັກການໃນການເຮັດວຽກຂອງ centrifuges: ວິທີການທີ່ບັງຄັບໃຊ້ໃນ centrifugal "ຊັ້ນ" ຊັ້ນ "ຊັ້ນ"?

1. ທໍາມະຊາດຂອງກໍາລັງແຮງ centrifugal

ຜົນບັງຄັບໃຊ້ Centrifugal ແມ່ນກໍາລັງທີ່ບໍ່ມີປະໂຫຍດທີ່ຈະສ້າງ "ກໍາລັງທີ່ບໍ່ມີຕົວຕົນ" ທີ່ເຮັດໃຫ້ວັດຖຸທີ່ຢູ່ຫ່າງຈາກສູນກາງຂອງການຫມູນວຽນຍ້ອນວ່າມັນຫມຸນຮອບແກນຂອງມັນ. ສູດແມ່ນ:

f = m ××× r
(m: ມະຫາຊົນຂອງວັດຖຸ; ω: ຄວາມໄວເປັນລ່ຽມ; r: radius ຂອງການຫມູນວຽນ)

2. ການເຮັດວຽກ

1. ໂຫລດຕົວຢ່າງເປັນທໍ່ centrifuge ແລະວາງມັນເປັນຮູບຮ່າງໃນ Rotor (ຮັບປະກັນຄວາມສົມດຸນ);
2. ກໍານົດຄວາມໄວ (RPM) ແລະເວລາທີ່ຈະເລີ່ມຕົ້ນນັບຖືພະຍັນຊະນະ;
3. ພາຍໃຕ້ການຫມູນວຽນຄວາມໄວສູງ, ສ່ວນປະກອບທີ່ມີຄວາມຫນາແຫນ້ນຕົກລົງພາຍນອກເພື່ອປະກອບເປັນ precipitates; ຄວາມຫນາແຫນ້ນຍັງຄົງຢູ່ໃນຊັ້ນເທິງ;
4. ຫຼັງຈາກການຢຸດເຊົາ, ແຫຼວແມ່ນຈັດວາງຕາມຄວາມຫນາແຫນ້ນແລະສາມາດດູດຊືມຊັ້ນໂດຍຊັ້ນ.

• ໂລໂກ: ສ່ວນປະກອບຫຼັກທີ່ບັນຈຸທໍ່ centrifuge (angular rotor / rotor ແນວນອນ);
• ຂັບເຄື່ອນມໍເຕີ: ສະຫນອງອໍານາດຫມູນວຽນ;
• ລະບົບຕູ້ເຢັນ (ເປັນທາງເລືອກ): ປ້ອງກັນຕົວຢ່າງຈາກຄວາມຮ້ອນເກີນໄປ;
• ລະບົບຄວບຄຸມ: ປັບຄວາມໄວ, ເວລາແລະອຸນຫະພູມ.

ການຈັດປະເພດແລະຕົວກໍານົດຫຼັກຂອງ centrifuges

1. ການຈັດປະເພດໂດຍຄວາມໄວ

2. ການວິເຄາະຂອງຕົວກໍານົດການສໍາຄັນ

ຜົນບັງຄັບໃຊ້ centrifugal ທີ່ກ່ຽວຂ້ອງ (RCF): ຕົວຊີ້ວັດຂອງປະສິດທິພາບແຍກຕ່າງຫາກຕົວຈິງ, ສູດ:

RCF = 1.118 ×10⁻⁵×10⁻⁵× R × (RPM) ²
(R: ລັດສະຫມີຂອງການຫມູນວຽນ, ຫນ່ວຍຫນຶ່ງຂອງຊັງຕີແມັດ)

ລະດັບຄວາມຄວບຄຸມອຸນຫະພູມ: -20 ℃ເຖິງ 40 ℃ເພື່ອປົກປ້ອງຕົວຢ່າງທີ່ລະອຽດອ່ອນ;
ຄວາມອາດສາມາດຂອງ Rotor: ຈາກຈໍານວນຂະຫນາດນ້ອຍ 0.2ML ໃນຈໍານວນຂະຫນາດໃຫຍ່ຂອງ 1L, ມັນສາມາດປັບຕົວໄດ້ກັບຄວາມຕ້ອງການທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.

ຕົວຢ່າງສະຫມັກຄລາສສິກ

ຕົວຢ່າງ 1: ການຈັດການກ່ຽວກັບເລືອດ (ການທົດສອບການແພດ)

ຈຸດປະສົງ: ແຍກ plasma, ເມັດເລືອດຂາວແລະເມັດເລືອດແດງ.

1. ເກັບຕົວຕົວຢ່າງໃນເລືອດທັງຫມົດແລະຕື່ມຢາຕ້ານເຊື້ອ;
2. centrifuge ໃນເວລາ 3000 rpm ເປັນເວລາ 10 ນາທີ;
3. ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຖືກຕ້ອງ (ດ້ານເທິງຫາລຸ່ມ): Plasma (55%), ເມັດເລືອດຂາວ / ສີຟ້າ (<1%), ເມັດເລືອດແດງ (45%).

ຕົວຢ່າງທີ 2: ການໂດດດ່ຽວຂອງ Orgaelles (ການຄົ້ນຄວ້າທາງຊີວະພາບ)

ເປົ້າຫມາຍ: ສະກັດເອົາ mitochondria ຫຼື nuclei ຈຸລັງ.

1. ຫຼັງຈາກ lysis ໃນຫ້ອງ, homogenate ແມ່ນ centrifuged ໃນຄວາມໄວຕ່ໍາ (1000 rpm) ເພື່ອກໍາຈັດຈຸລັງທີ່ບໍ່ໄດ້ທໍາລາຍ;
2. supernatant ແມ່ນ centrifuged ຢູ່ທີ່ 10,000 rpm ເພື່ອ precipitate mitocondria;
3. micnatant ສຸດທ້າຍແມ່ນ ultracentrifuged (100,000 rpm) ເພື່ອໃຫ້ໄດ້ຮັບ microsomes.

ກຸນແຈ: ຄວາມບໍລິສຸດແມ່ນໄດ້ຮັບການປັບປຸງໂດຍການປັບປຸງ centrifugation gradient (ຕົວຢ່າງ, sucrose ຄວາມຫນາແຫນ້ນ).

ຕົວຢ່າງທີ 3: ການສະກັດເອົາ DNA (ໂມເລກຸນຊີວະສາດ)

ຈຸດປະສົງ: ແຍກແລະຊໍາລະລ້າງ DNA ຈາກຈຸລັງ.

1. ຈຸລັງ lysing ເພື່ອປົດປ່ອຍ DNA;
2. ຕື່ມການ binding buffer ແລະ centrifuge ໃນຄວາມໄວສູງເພື່ອ adsorb dna ໄປເຍື່ອ silica gel;
3. ການລ້າງເພື່ອກໍາຈັດຄວາມບໍ່ສະອາດ;
4. DNA ໄດ້ຖືກ eluted ໂດຍ centrifugation ຄວາມໄວຕ່ໍາ.

ຂະບວນການບໍລິສຸດ Centrifugal DNA

ຕົວຢ່າງທີ 4: ການກັ່ນຕອງ Nanomaterials (ວິທະຍາສາດວັດສະດຸ)

ຈຸດປະສົງ: ເພື່ອແຍກ nanoparticles ຄໍາຂອງຂະຫນາດເຂົ້າໃນຂະຫນາດທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.

1. ສ່ວນປະສົມທີ່ຖືກສັງເຄາະແມ່ນ centrifuged ໃນຄວາມໄວໃນ gradient:
2. 5000 rpm ກໍາຈັດເຄື່ອງປະດັບສ່ວນໃຫຍ່.
3. ເກັບຂະຫນາດອະນຸພາກຂອງເປົ້າຫມາຍ (ຕົວຢ່າງ, 20NM) ທີ່ 15,000 RPM;
4. 20,000 rpm ຈັບເຂົ້າຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າ (5NM).

ການສົ່ງຕໍ່ microscopy electron (tem) ຢັ້ງຢືນການແຈກຢາຍຂະຫນາດຂອງອະນຸພາກ.

ການລະມັດລະວັງການດໍາເນີນງານ

• ສົມດຸນແລະ symmetry: ທໍ່ centrifuge ຕ້ອງໄດ້ຮັບການໃສ່ເປັນ symmetrically, ມີຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ມີຄຸນນະພາບຂອງ≤0.1gເພື່ອຫລີກລ້ຽງອຸບັດຕິເຫດທີ່ເກີດຈາກຄວາມບໍ່ສົມເຫດສົມຜົນຂອງການຂີ່ລົດ;
• ຂອບເຂດຈໍາກັດຄວາມໄວ: ມັນຖືກຫ້າມຢ່າງເຂັ້ມງວດໃຫ້ເກີນຄວາມໄວທີ່ໃຫ້ຄະແນນຂອງ ROTOR;
• ພະເຈົ້າຊີວະພາບ: ຕົວຢ່າງເຊື້ອພະຍາດຕ້ອງການການນໍາໃຊ້ຜົນຜະລິດທີ່ມີປະທັບຕາຫຼືຊີວະປະຫວັດ Biosafety Centrifetges;
• ການບໍາລຸງຮັກສາ: ທໍາຄວາມສະອາດເປັນປົກກະຕິການກັດກ່ອນແລະກວດເບິ່ງຄວາມເຖົ້າແກ່ຂອງແຫວນປະທັບຕາ.

Outlook ໃນອະນາຄົດ: ທາງແລະ miniaturization

• centrifuge ສະເຫມີ: ຜູ້ຕິດຕາມກວດກາການຕິດຕາມກວດກາ Centors Centrifugal Force ແລະອຸນຫະພູມໃນເວລາຈິງແລະປັບຕົວກໍານົດອັດຕະໂນມັດ;
• handheld centrifuge: ອຸປະກອນຈຸນລະພາກສະຫະລັດ Power ເພື່ອຕອບສະຫນອງຄວາມຕ້ອງການຂອງການທົດສອບໃນສະຖານທີ່ຢ່າງໄວວາ;
• ການອອກແບບສີຂຽວ: ມີສຽງຕ່ໍາ, ເປັນຕຸ່ມຕຸ່ມຕ່ໍາພະລັງງານໄດ້ກາຍເປັນກະແສຫຼັກ.

Centrifues ບັນລຸລະບົບການແຍກລະບົບປະສົມປະສິດຕິພາບໂດຍຜ່ານຫຼັກການທາງກາຍະພາບທີ່ລຽບງ່າຍ. ຈາກການບົ່ງມະຕິທາງການແພດກັບການຄົ້ນຄວ້າວິທະຍາສາດການຕັດ epper, ມັນຍັງສືບຕໍ່ຍູ້ຂອບເຂດຂອງການພັດທະນາວິທະຍາສາດ. ເຂົ້າໃຈຫຼັກການແລະການດໍາເນີນງານທີ່ກໍານົດມາດຕະຖານແມ່ນທັກສະທີ່ຈໍາເປັນສໍາລັບທຸກໆຄົນທົດລອງ.